南宫28NG相信品牌力量，以下为猪蓝耳荧光PCR检测试剂盒（实时荧光PCR法）的使用说明。

产品名称

通用名称：猪蓝耳荧光PCR检测试剂盒（实时荧光PCR法）
英文名称：Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus Detection Kit (Real-Time PCR Method)

包装规格

50T/盒

预期用途

本试剂盒基于实时荧光PCR原理，用于定性检测猪蓝耳病病毒，能够为猪蓝耳病病毒的诊断及疗效评估提供重要指导。

原理

本试剂盒针对猪蓝耳病病毒的高度保守区域设计了特异性引物和探针。在存在猪蓝耳病病毒基因组模板时，PCR反应会释放荧光信号。通过荧光定量PCR仪对PCR过程中的信号进行实时监测，实现定性分析。

试剂盒组成

序号
组成
50T/盒
1. PRRSV RT-PCR反应液：875 μL × 1管
2. PRRSV混合酶液：125 μL × 1管
3. PRRSV阳性对照：40 μL × 1管
4. PRRSV阴性对照：40 μL × 1管
5. 说明书：1份
注：阴性对照为灭菌纯水，阳性对照为含猪蓝耳靶基因的质粒。

储存条件及有效期

避光保存于-20℃以下，避免多次冻融，有效期12个月。

适用仪器

本试剂盒适配以下多通道实时荧光定量PCR仪：ABI系列、Bio-Rad系列、Agilent Stratagene MX系列、Roche LightCycler R480、Cepheid SmartCycler、Rotor-Gene系列、杭州博日系列等。

样本要求

1. 对于血液或血清样品：使用无菌注射器抽取样品，放于离心管中待检。
2. 对于肺脏、淋巴结和脾脏样品：采集20g样本，用少量灭菌PBS磨至糊状，再用4倍PBS稀释，8000rpm 4℃离心10min，取上清样本。
3. 应避免标本间交叉污染。
4. 样本收集后可立即检测；如无法立即检测，需在2～8℃下冷藏；如需长期保存，样本应冻存于-80℃以下。

检验方法

1. 试剂准备（试剂准备区）：取出所需试剂，融化混匀后瞬时离心去除附着液体；计算实验所需反应数并准备相应试剂量。
2. 样本准备（样本处理区）：使用QIAGEN、Roche RNA提取试剂盒提取RNA，具体按照说明书操作。
3. 加样: 向PCR反应管中加入5μL待测标本RNA，正负对照分别加入阴性和阳性对照品各5μL，终体积为25μL。
4. PCR（PCR扩增区）: 将PCR反应管放入仪器中并设置扩增参数。

检验结果的解释

- FAM+：标本中检出猪蓝耳病病毒。
- FAM-：标本中未检出猪蓝耳病病毒。

产品性能指标

产品的最低检出限为103 Copies/mL，CV值≤3%。

注意事项

1. 使用本试剂盒的实验室应遵循国家基因扩增检测实验室管理规范。
2. 为避免RNA降解，样本处理应在0-4℃条件下进行，使用无核酶处理的器具。
3. 各区域物品须专用，避免交叉污染。
4. 使用后的吸头应丢弃到废物缸，工作台及实验器具应定期消毒。
5. 试剂使用前需在常温下融化混匀。

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